合成生物催化剂

摘译自:http://apps.webofknowledge.com/full_record.do?product=DIIDW&search_mode=GeneralSearch&qid=1&SID=5CUMe3MSAc6KSJVXujU&page=1&doc=4&UT=DIIDW:202085147F&cacheurlFromRightClick=no

传统上,L-氨基酸是通过利用天然微生物或其突变体通过发酵方法进行工业生产的。通常也会对微生物进行修饰以提高L-氨基酸的产量。目前已经报道了许多提高L-氨基酸产量的技术,包括用重组DNA转化微生物(例如美国专利No. 4278765 A)和改变表达调控区,例如启动子,前导序列和衰减子等等(例如专利US20060216796 A1WO9615246 A1)。其他提高产量的技术包括提高氨基酸生物合成中涉及的酶的活性和/或使目标酶对所得L-氨基酸的反馈抑制不敏感(例如专利WO9516042A1EP0685555A1或美国专利No. 4346170ANo. 5661012ANo. 6040160A)。

提高L-氨基酸产量的另一方法是弱化一个或多个与目标L-氨基酸降解有关的基因的表达,减弱将目标L-氨基酸的前体分流至其他途径的基因的表达,弱化参与碳,氮,硫和磷酸盐通量再分配的基因,以及编码毒素的基因等。

大肠杆菌ydiJ基因编码的天然蛋白YdiJ被表征为含Fe4S4FAD的蛋白质。然而,以前从未有报道过表达ydiJ对肠杆菌科产L-氨基酸细菌的发酵会有作用。日本味之素公司公开的专利WO2020171227-A1证明,在已被改造用于生产L-氨基酸的肠杆菌科细菌中,过表达ydiJ,可以增强L-氨基酸的生产。

专利权利要求简述为:

1. 在培养基中培养肠杆菌科的L-氨基酸生产细菌,以在培养基,细菌细胞或两者中产生和积累L-氨基酸。

2. 从培养基,细胞或两者中收集所述L-氨基酸,其中所述细菌已被修饰以过表达ydiJ基因。

3. 通过引入ydiJ基因,增加ydiJ基因的拷贝数和/或通过修饰ydiJ基因的表达调节区,使所述ydiJ基因过表达。 与未修饰的细菌相比,所述基因的表达增强。

4. 所述细菌属于埃希氏菌属或泛菌属。

5. 所述L氨基酸选自芳香族L氨基酸,非芳香族L-氨基酸,含硫L-氨基酸, 及其组合。

 

(张译文 摘译)


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