合成生物催化剂
摘译自:https://www.liebertpub.com/doi/full/10.1089/crispr.2021.0018
CRISPR转座酶在不引入DNA双链断裂的情况下实现基因组特定位点的DNA整合,不受宿主同源重组效率的限制。杨晟实验室将其部署为基于CRISPR-转座系统的多拷贝染色体整合工具(Multiple chromosomal integration by CRISPR associated transposase, MUCICAT),应用于重组蛋白质表达基因剂量优化,但还未展示其多重基因中断这一优势。
杨晟实验室近日在The CRISPR Journal期刊发表文章“Programming Cells by Multicopy Chromosomal Integration Using CRISPR-Associated Transposases”报道了升级版的MUCICAT,以N-乙酰氨基葡萄糖的合成为例,需要完成2基因簇中断与1-11拷贝菌株文库构建工作。即使使用最新版的Cas9系统,预计也需要构建13个质粒,14轮转化,30天时间。使用MUCICAT仅需构建2个质粒,4轮转化,8天时间。多拷贝文库中一株5拷贝菌株为质粒版生产菌株产量的6倍以上,且更稳定。
MUCICAT看来可以将细胞编程速度提升数倍,在代谢工程等领域会得到广泛的应用。
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(张译文 摘译)
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