合成生物催化剂

摘译自:https://www.liebertpub.com/doi/full/10.1089/crispr.2021.0018 

CRISPR转座酶在不引入DNA双链断裂的情况下实现基因组特定位点的DNA整合,不受宿主同源重组效率的限制。杨晟实验室将其部署为基于CRISPR-转座系统的多拷贝染色体整合工具(Multiple chromosomal integration by CRISPR associated transposase, MUCICAT),应用于重组蛋白质表达基因剂量优化,但还未展示其多重基因中断这一优势

杨晟实验室近日The CRISPR Journal期刊发表文章“Programming Cells by Multicopy Chromosomal Integration Using CRISPR-Associated Transposases”报道了升级版的MUCICAT,N-乙酰氨基葡萄糖的合成为例,需要完成2基因簇中断与1-11拷贝菌株文库构建工作即使使用最新版的Cas9系统预计也需要构建13个质粒,14轮转化,30天时间。使用MUCICAT仅需构建2个质粒,4轮转化,8天时间。多拷贝文库中一株5拷贝菌株质粒生产菌株产量6倍以上,且稳定。

MUCICAT看来可以将细胞编程速度提升数倍代谢工程等领域会得到广泛的应用

相关质粒已分享在Addgene与Molecular Cloud平台:Addgene ID: 170628~170638,Molecular Cloud ID: MC_0101242~ MC_0101252。如果你实验室所在单位因受美国制裁不能从相关平台获取,请访问公众号菜单--技术咨询-需菌株质粒。

(张译文 摘译)


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