合成生物催化剂

摘译自：https://www.liebertpub.com/doi/full/10.1089/crispr.2021.0018 

CRISPR转座酶在不引入DNA双链断裂的情况下实现基因组特定位点的DNA整合，不受宿主同源重组效率的限制。杨晟实验室将其部署为基于CRISPR-转座系统的多拷贝染色体整合工具（Multiple chromosomal integration by CRISPR associated transposase, MUCICAT）,应用于重组蛋白质表达基因剂量优化，但还未展示其多重基因中断这一优势。

杨晟实验室近日在The CRISPR Journal期刊发表文章“Programming Cells by Multicopy Chromosomal Integration Using CRISPR-Associated Transposases”报道了升级版的MUCICAT，以N-乙酰氨基葡萄糖的合成为例，需要完成2基因簇中断与1-11拷贝菌株文库构建工作。即使使用最新版的Cas9系统，预计也需要构建13个质粒，14轮转化，30天时间。使用MUCICAT仅需构建2个质粒，4轮转化，8天时间。多拷贝文库中一株5拷贝菌株为质粒版生产菌株产量的6倍以上，且更稳定。

MUCICAT看来可以将细胞编程速度提升数倍，在代谢工程等领域会得到广泛的应用。

相关质粒已分享在Addgene与Molecular Cloud平台：Addgene ID: 170628~170638，Molecular Cloud ID: MC_0101242~ MC_0101252。如果你实验室所在单位因受美国制裁不能从相关平台获取，请访问公众号菜单--技术咨询-需菌株质粒。

（张译文 摘译）